溶藻弧菌单克隆抗体的制备及应用

小鼠骨髓瘤细胞系sp2/0与经溶藻弧菌(1.1587)免疫的balb3/c雌鼠脾细胞在peg条件下融合,有45.8%的培养孔有杂交瘤细胞生长,其培养上清液抗体阳性率为77.4%.经反复有限稀释法克隆杂交瘤细胞,获得7株抗溶藻弧菌的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别为:ac1-c9,ac1-c11,bb4-d4,ad1-a3,ad1-f3,ad2-e7,ad2-f7.取ad1-f3扩大培养,注射小鼠,制备了抗溶藻弧菌的单克隆抗体腹水,滴度为1:1000.该腹水与其他3株溶藻弧菌菌株有强交叉反应,与其他13株标准菌株无交叉反应.利用制备的单抗腹水,建立了检测溶藻弧菌的单抗-elisa技术.该反应系统可应用于溶藻弧菌的快速诊断,反应时间为6-7h,检测灵敏度为104cells·-1.并利用该检测方法进行了11份待测菌样本溶藻弧菌的检测.