建鲤催乳素基因全长cdna的克隆及序列分析和组织表达

为了解催乳素(prolactin，prl)的基因序列以及在建鲤渗透调节组织中的表达情况，采用同源克隆和末端快速扩增(rapidamplicationofcdnaends，race)的方法分离克隆了建鲤(cyprinuscarpiovar.jian)prl基因全长cdna，得到1028bp的全长cdna，包括633bp的开放阅读框(orf)，51bp的5′末端非编码区(utr)以及344bp的3′末端非编码区(utr)。对该基因序列和推测的氨基酸序列进行同源性比对和系统分析显示：建鲤与其它硬骨鱼类该基因的氨基酸序列相似度为55.02%~94.76%，与草鱼(ctenopharyngodonidella)相似度最高(94.76%)，与齐口裂腹鱼(schizothoraxprenanti)、斑马鱼(daniorerio)相似度稍低，与红鳍东方鲀(takifugurubripes)的相似度较低(55.02%)，表明不同物种间prl的氨基酸序列具有较高的保守性。用实时定量pcr(rtpcr)检测该基因在建鲤脑垂体、脑、肠、鳃、性腺、肝、脾、肾中prl的相对表达量，其中脑垂体最高，其次是肝、鳃、脾、脑、肠、肾，在性腺中也有较低的表达量，表明脑垂体是建鲤prl基因的主要表达场所，在性腺、肝、脾的表达说明其在鱼体内除了渗透调控可能还存在多种生理功能。