%0 Journal Article %T Construction and characterization of ompH gene knockout mutant of avian Pasteurella multocida C48-3
禽多杀性巴氏杆菌C48-3株ompH基因敲除突变株的构建及其生物学功能 %A Wulumuhan Nazierbieke %A Yufeng Zhang %A Fengjuan Gong %A Sawada Takuo %A Entomack Borrathybay %A
吾鲁木汗·那孜尔别克 %A 张宇凤 %A 龚凤娟 %A 泽田拓士 %A 恩特马克·布拉提白 %J 微生物学报 %D 2013 %I %X 摘要:【目的】探讨ompH 基因在禽多杀性巴氏杆菌致病过程中的作用。【方法】利用同源重组原理构建中间为四环素抗性基因,两侧为ompH基因上下游同源序列同源的敲除载体pWSK29ΔompH,将敲除载体电击转入C48-3株感受态细胞中,通过四环素抗性和菌落PCR 筛选ompH 基因的敲除突变株,并通过组合PCR、逆转录PCR和DNA测序对突变株进行验证。用生物学功能实验比较野生株、互补株和突变株在生长速率、荚膜结构、粘着能力和致病性等方面的差异。【结果】组合PCR、逆转录PCR 和DNA 测序结果证实ompH基因的敲除突变株C48-3ΔompH构建成功,电镜观察结果证实ompH基因的缺陷影响细菌的荚膜合成能力,粘附实验结果显示与野生株C48-3和互补株C48-3C相比突变株C48-3ΔompH对CEF细胞的粘附能力显著降低(P<0.01),而小鼠毒力实验结果表明突变株C48-3ΔompH的致病性相对减弱。【结论】本实验构建的突变株C48-3ΔompH,为进一步研究多杀性巴氏杆菌的致病机理奠定基础。 %K 关键词:禽多杀性巴氏杆菌,ompH基因,敲除突变,粘附,致病性 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=B852FA1BC7AB8CC250CF334B33358F3D&yid=FF7AA908D58E97FA&vid=8E6AB9C3EBAAE921&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=5C3443B19473A746&eid=B9704B40A4225A24&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0