%0 Journal Article %T 抗Ⅰ型马立克氏病毒sorf2蛋白的多克隆抗体制备及其特异性鉴定 %A 崔宁 %A 苏帅 %A 李久庆 %A 赵鹏 %A 李延鹏 %A 丁家波 %A 崔治中 %J 微生物学报 %D 2013 %I %X 摘要:【目的】制备高效价鼠和兔抗Ⅰ型马立克氏病毒(Marek's disease virus,MDV) sorf2蛋白的多克隆抗体并对其特异性进行鉴定。【方法】以Ⅰ型MDV GX0101为模板,利用PCR扩增sorf2基因,分别克隆进原核表达载体pET-28a(+)和pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(Rosetta),经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导后进行融合蛋白的表达和纯化。用纯化的融合目的蛋白常规免疫6-8周龄Balb/c小鼠和成年新西兰大白兔,制备抗sorf2蛋白的多克隆抗体。用Western blot和间接免疫荧光试验鉴定多克隆抗体的特异性。【结果】Ⅰ型MDV的sorf2基因在原核表达载体中能够正确表达,免疫小鼠和兔后能获得与sorf2蛋白发生特异性反应的高效价的多克隆抗体。【结论】制备的抗sorf2 蛋白的多克隆抗体能够特异的鉴定MDV sorf2基因缺失株,有效的区分MDV 疫苗株HVT(FC-126)与Ⅰ型MDV毒株,用于临床MDV 野毒的分离鉴定。 %K 关键词:Ⅰ型马立克氏病毒,sorf2 %K 基因,多克隆抗体,Western %K blot,间接免疫荧光 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=62DBC20A59286BA3577DD6BB741BBC6D&yid=FF7AA908D58E97FA&vid=8E6AB9C3EBAAE921&iid=38B194292C032A66&sid=03E56C113B4E5A88&eid=8BB50A069C48D50B&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0