%0 Journal Article
%T Correlation between thermostability of the xylanase EvXyn11TS and its N-terminal disulfide bridge<br>木聚糖酶EvXyn11TS耐热性与其N端二硫键的相关性分析
%A Rou Min
%A Jianfang Li
%A Shujuan Gao
%A Huimin Zhang
%A Jing Wu
%A Minchen Wu
%A <br>闵柔
%A 李剑芳
%A 高树娟
%A 张慧敏
%A 吴静
%A 邬敏辰
%J 微生物学报
%D 2013
%I 
%X 摘要:【目的】以糖苷水解酶11 家族耐热木聚糖酶EvXyn11TS为研究对象，定点突变其编码基因Syxyn11，揭示EvXyn11TS耐热性与其N端二硫键的相关性。【方法】对不同来源的、与EvXyn11TS一级结构相似度较高的若干11家族木聚糖酶进行多序列同源比对，发现只有耐热的EvXyn11TS在其N端存在一个二硫键(Cys5－Cys32);运用分子动力学模拟预测该N端二硫键存在与否对木聚糖酶热稳定性的影响。以人工合成的Syxyn11为母本，采用PCR技术将其编码Cys5的密码子TGT突变为编码Thr5的ACT，构建去除了N端二硫键的突变酶(EvXyn11M)的编码基因Syxyn11M;分别将Syxyn11和Syxyn11M在毕赤酵母GS115中进行表达，并分析表达产物EvXyn11TS和EvXyn11M的温度和pH特性。【结果】酶学性质研究结果表明:EvXyn11M的最适温度Topt由突变前的85℃降至70℃;EvXyn11TS在90℃的半衰期t1/290为32 min，而EvXyn11M在70℃的半衰期t1/270仅为8.0 min。【结论】运用分子动力学模拟预测了N端二硫键对EvXyn11TS耐热性的重要作用，并通过定点突变验证之，为其它与耐热EvXyn11TS一级结构相似的、11家族常温高比活性木聚糖酶的耐热性改造提供了新的技术策略。
%K 关键词:木聚糖酶，耐热性，N端二硫键，分子动力学模拟，定点突变
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A3C6BA55AB623B90FA9104CFFC826F3C&aid=72635710F9154EE4C937D6FEA8658EB1&yid=FF7AA908D58E97FA&vid=8E6AB9C3EBAAE921&iid=E158A972A605785F&sid=C7DDDE86E6286CD9&eid=A5111BA190517959&journal_id=0001-6209&journal_name=微生物学报&referenced_num=0&reference_num=0