%0 Journal Article
%T The preparation of the recombinant Fusion protein Human Retinal Pigment Epithelium-Derived Factor and the analysis of its angiogenesis activity<br>重组人色素上皮细胞衍生因子融合蛋白的制备及其抑制新生血管
%A 王亚妮
%A 刘先宁
%A 朱娟莉
%A 安娜
%A 朱秀萍
%J 中国生物工程杂志
%D 2008
%I 
%X 目的:人色素上皮细胞衍生因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)是一种有效的新生血管形成抑制因子和神经营养因子.通过原核细胞表达人PEDF蛋白,鉴定其抑制新生血管的生物学活性.方法:采用PCR法扩增人PEDFcDNA,将其克隆到pET32a载体中,在大肠杆菌BL21中表达人PEDF蛋白.经SDS-PACE和western blot鉴定后,镍柱亲和层析法变性条件下纯化重组融合蛋白.Braclford法测蛋白浓度,采用鸡胚脲囊膜法测其对新生血管形成的影响.结果:成功构建了pET32a-PEDF表达载体.重组人PEDF蛋白在BL21宿主菌中获得了稳定高效表达,鸡胚脲囊膜实验结果显示在重组蛋白浓度为0.4、0.04 ng/Hd时均有对新生血管的显著抑制作用(P<0.01),而在4 ng/ml时无抑制作用.结论:成功高效表达及纯化了重组人PEDF蛋白,鉴定其抑制新生血管的生物学活性,并且证实该活性在一定范围内有效,为进一步研究其功能及推广应用奠定了基础.
%K 人色素上皮细胞衍生因子
%K 原核表达
%K 新生血管
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=1FC4807C3DB8548EF7C1A1C284AA668A&yid=67289AFF6305E306&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=59906B3B2830C2C5&sid=59906B3B2830C2C5&eid=BCA2697F357F2001&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=10