%0 Journal Article
%T Soluble Expression, Purification, DNA Binding Activity of Mouse TAp63γ and Two Deltion Mutants Fusion Proteins<br>小鼠TAp63γ及两种突变体的原核表达、纯化和DNA结合活性
%A Yan Jun-Xi
%A <br>严君喜
%A 黄新河
%A 杜林方
%A Zhi-Xiong
%A Jim
%A Xiao
%J 中国生物工程杂志
%D 2008
%I 
%X 采用PCR扩增法得到小鼠TAp63γ野生型及两种缺失突变体的cDNA,3种cDNA与表达载体pGEX-2TK重组构建成GST融合表达质粒并转化感受态E.coli BL21 (DE3),经IPTG诱导了小鼠TAp63γ野生型及两种缺失突变体的可溶性表达.诱导表达的菌液经离心收集菌体、超声破碎及Triton X-100增溶后获得可溶性表达蛋白粗提液. 利用Glutathione Sepharose 4 Fast Flow亲合层析纯化出电泳均一的3种GST融合蛋白.凝胶滞留分析证实仅野生型小鼠TAp63γ蛋白能特异结合p53靶序列,经序列比对及同源建模分析,表明小鼠TAp63γ DBD结合区的完整性、关键氨基酸的保守性及三维结构的相似性可能是其DNA结合活性所必需的.
%K 融合蛋白
%K 缺失突变
%K 原核表达
%K 凝胶滞留
%K 序列比对
%K 同源建模
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=951380788B355DEA7D75520FA3B199C9&aid=620FEA150743F463802B870E53D91660&yid=67289AFF6305E306&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=9CF7A0430CBB2DFD&sid=7C3A4C1EE6A45749&eid=94E7F66E6C42FA23&journal_id=1671-8135&journal_name=中国生物工程杂志&referenced_num=0&reference_num=20