%0 Journal Article
%T Desarrollo y validaci車n de una PCR m迆ltiple para el diagn車stico de Bordetella spp. Desenvolvimento e valida  o de uma PCR m迆ltipla para o diagn車stico de Bordetella spp. Development and validation of a multiplex PCR for diagnosis of Bordetella spp.
%A Luis Alfredo Pianciola
%A Melina Leonor Mazzeo
%A Dar赤o Flores
%A Daniela Flavia Hozbor
%J Acta bioquˋ-mica clˋ-nica latinoamericana
%D 2012
%I Federaci車n Bioqu赤mica de la Provincia de Buenos Aires
%X El objetivo del trabajo consisti車 en dise ar y validar una PCR en formato convencional que permita confirmar la presencia o ausencia de Bordetella pertussis y detectar otras especies del g谷nero, como Bordetella parapertussis y Bordetella bronchiseptica, que pudieran estar involucradas en el cuadro cl赤nico de coqueluche. A tal fin se dise 車 una reacci車n en cadena de la polimerasa (PCR) m迆ltiple que amplifica una secuencia del promotor del gen de Toxina Pertussis y otra del gen de la Toxina Adenilato Ciclasa-Hemolisina. Se valid車 la metodolog赤a siguiendo esquemas publicados anteriormente. Se optimizaron las condiciones de la PCR. Se valid車 la metodolog赤a obteni谷ndose un l赤mite de detecci車n para ambas secuencias de 0,5 bacterias por reacci車n. Se valid車, adem芍s, la especificidad y robustez de la t谷cnica. Se presenta una nueva herramienta diagn車stica optimizada y validada, que permite detectar la presencia de las especies de Bordetella m芍s frecuentemente involucradas en el cuadro cl赤nico de coqueluche. Su uso combinado con alguna de las PCR habituales en diagn車stico, como la PCR IS481, permite aumentar la sensibilidad del diagn車stico de esta en-fermedad, la especificidad del mismo discriminando los resultados falsos positivos/negativos y aumentar el conocimiento sobre los agentes etiol車gicos implicados en esta patolog赤a. O objetivo do trabalho foi desenhar e validar uma rea  o em cadeia da polimerase (PCR) em formato convencional que permita confirmar a presen a ou aus那ncia de Bordetella pertussis e detectar outras esp谷cies do g那nero, como Bordetella parapertussis e Bordetella bronchiseptica, que pudessem estar envolvidas no quadro cl赤nico de coqueluche. Para tal, foi desenhada uma PCR m迆ltipla que amplifica uma sequ那ncia do promotor do gene de Toxina Pertussis e outra do gene da Toxina Adenilato Ciclase-Hemolisina. A metodologia foi validada seguindo esquemas publicados anteriormente. Foram otimizadas as condi  es da PCR. Validou-se a metodologia obtendo-se um limite de detec  o para ambas as sequ那ncias de 0,5 bact谷rias por rea  o. Validou-se tamb谷m a especificidade e robustez da t谷cnica. Apresenta-se uma nova ferramenta diagn車stica otimizada e validada, que permite detectar a presen a das esp谷cies de Bordetella mais frequentemente envolvidas no quadro cl赤nico de coqueluche. Seu uso combinado com alguma das PCR habituais em diagn車stico, como a PCR IS481, permite aumentar a sensibilidade do diagn車stico desta doen a, a especificidade do mesmo discriminando os resultados falsos positivos/negativos e aumentar o conhecimento sobre os agentes etiol車gicos envolvido
%K Bordetella pertussis
%K Bordetella parapertussis
%K Bordetella bronchiseptica
%K Reacci車n en cadena de la polimerasa
%K Bordetella pertussis
%K Bordetella parapertussis
%K Bordetella bronchiseptica
%K Rea  o em cadeia de Polimerase
%K Bordetella pertussis
%K Bordetella parapertussis
%K Bordetella bronchiseptica
%K Polymerase chain reaction
%U http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572012000400010