%0 Journal Article
%T Genes con islas CpG amplificados con la mezcla formamida, alb迆mina s谷rica bovina y dimetilsulf車xido Genes com Ilhas CpG amplificados com a mistura formamida, albumina s谷rica bovina, e dimetilsulf車xido CG-rich genes amplified with the formamide, bovine seric albumin y dimethylsulfoxide mix
%A Miriam Carolina Mart赤nez-L車pez
%A Freddy De la Cruz Ruiz
%A Jos谷 Luis Cortes-Peˋaloza
%A Daniel Cadena-Sandoval
%J Acta bioquˋ-mica clˋ-nica latinoamericana
%D 2012
%I Federaci車n Bioqu赤mica de la Provincia de Buenos Aires
%X Diversos aditivos qu赤micos han sido utilizados para garantizar la polimerizaci車n de genes con islas CpG. El objetivo de este trabajo fue dise ar una mezcla potenciadora de PCR para amplificar genes con islas CpG. Con ese fin se analizaron fragmentos de los genes IRS2 y HNF1a con el programa EMBOSS CpG Report. Los iniciadores se dise aron con el programa Primer 3 y se analizaron con el programa e-PCR. Se usaron tres aditivos qu赤micos: Alb迆mina s谷rica bovina (0,1米g/米L), dimetilsulf車xido (5%) y formamida (5%) para 5 ensayos de PCR: dos usando un solo aditivo, dos combinando dos aditivos y uno combinando tres aditivos. Las amplificaciones con las mezclas se realizaron con las enzimas Taq Nativa, taq Recombinante y Taq Platinum. La calidad de los amplicones se prob車 por secuenciaci車n. Fragmentos sin islas CpG (HNF-1a) amplificaron con las tres enzimas, sin el uso de los aditivos pero presentaron problemas de pureza en la secuenciaci車n. Los fragmentos del gen IRS2 con islas CpG amplificaron s車lo con la combinaci車n de tres aditivos dimetilsulf車xido, alb迆mina s谷rica bovina y formamida, independientemente de la enzima usada, las secuencias fueron limpias. Se concluye que la mezcla de tres aditivos es una soluci車n que permite obtener amplicones de alta calidad en genes con islas CpG, con cromatogramas limpios en la secuenciaci車n. Diversos aditivos qu赤micos t那m sido utilizados para garantir a polimeriza  o de genes com ilhas CpG. O objetivo do trabalho foi desenhar uma mistura que potencie PCR para amplificar genes com ilhas CpG. Para esta finalidade foram analisados fragmentos dos genes IRS2 e HNF1a com o programa EMBOSS CpG Report. Os iniciadores foram desenhados com o programa Primer 3 e se analisaram com o programa e-PCR. Foram utilizados tr那s aditivos qu赤micos: Albumina s谷rica bovina (0,1米g/米lL, Dimetilsulf車xido (5%) e formamida (5%) para 5 ensaios de PCR: dois usando um 迆nico aditivo, dois combinando dois aditivos e um combinando tr那s aditivos. As amplifica  es com as misturas se realizaram com as enzimas, Taq Nativa, taq Recombinante e Taq Platinum. A qualidade das amplia  es foi provada por sequencia  o. Fragmentos sem ilhas CpG (HNF-1a) amplificaram com as tr那s enzimas, sem o uso dos aditivos por谷m apresentaram problemas de pureza na sequencia  o. Os fragmentos do gene IRS2 com ilhas CpG ampli-ficaram apenas com a combina  o de tr那s aditivos dimetilsulf車xido, albumina s谷rica bovina e formamida, independentemente da enzima usada, as sequ那ncias foram limpas. A conclus o que a mistura de tr那s aditivos 谷 uma solu  o que permite obter amplia  es de alta qualida
%K Islas CpG
%K Potenciadores de reacci車n en cadena de la polimerasa
%K Gen sustrato del receptor de la insulina 2
%K Gen factor nuclear del hepatocito 1a
%K Ilhas CpG
%K Potenciadores de rea  o em cadeia da polimerase
%K Gene substrato receptor da insulina 2
%K Gene fator nuclear do hepat車cito 1a
%K CpG island
%K Chemistry enhancer polymerase chain reaction
%K Insulin receptor substrate 2 gene
%K Hepatic nuclear factor 1a gene
%U http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572012000200012