%0 Journal Article
%T Inmunomarcaci車n de neuronas dopamin谷rgicas en cortes flotantes de hipot芍lamo de rata: preservaci車n alternativa del tejido nervioso antes del corte Immunohistochemical Studies Of Dopaminergic Neurons On Free Floating Sections: Alternative Cryopreservation Method Of Nervous Tissue Before Cutting
%A Valeria Cholich
%A Graciela Garc赤a
%A Alejandra Mart赤nez
%A Ana Mar赤a Evangelista de Duffard
%J Acta Toxicol車gica Argentina
%D 2008
%I 
%X Se realiz車 un estudio inmunohistoqu赤mico de la enzima tirosina hidroxilasa (marcador de neuronas dopamin谷rgicas) en el hipot芍lamo de ratas Wistar machos adultas en cortes flotantes de muestras fijadas por perfusi車n. Debido a que el n迆mero de cerebros que se procesaron fue superior al n迆mero que pueden ser cortados inmediatamente, el material debi車 almacenarse congelando los cerebros enteros a -80oC. Pero por un desperfecto t谷cnico del equipo de refrigeraci車n, las muestras debieron trasladarse a -20oC resultando en el deterioro de las mismas. Ante este inconveniente, los sucesivos cerebros fueron almacenados en sacarosa al 30% p/v en buffer fosfato salino (PBS) con 0,01% de azida s車dica y mantenidos a 4oC durante tiempos variables (de semanas a meses) hasta ser congelados con gas clorofluorado y cortados. Estos cerebros no mostraron alteraci車n en la estructura morfol車gica del tejido. Esta metodolog赤a de preservaci車n aqu赤 descrita ser赤a una alternativa de elecci車n v芍lida para aquellos laboratorios que no cuenten con un equipo de refrigeraci車n de -80oC. In central nervous system histological studies, free-floating sections of perfusion-fixed samples are frequently used. Samples storage may be performed freezing either the entire brain at -80oC or sections at -20oC. When studying hypothalamic tyrosine hydroxylase enzyme (dopaminergic neurons marker) by immunohistochemistry in adult male Wistar rats, entire brains were stored at -80oC. Due to an abrupt freezer technical failure, samples should be thawed to -20oC with the resulting samples damage. To avoid this situation, subsequent brains were stored in 30% sucrose in saline phosphate buffer (PBS) with 0.01% sodium azide and kept at 4oC for different periods (weeks to months) until they were frozen with chlorofluorade gas and cut. These brains showed no morphological alterations of tissue structure. This preservation method appeared to be an alternative valid option to laboratories with no -80oC freezing equipment.
%K Inmunohistoqu赤mica
%K Tirosina hidroxilasa
%K Cortes flotantes
%K Criopreservaci車n
%K Immunohistochemistry
%K Tyrosine hydroxylase
%K Free floating sections
%K Cryopreservation
%U http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1851-37432008000100001