%0 Journal Article
%T Implementaci車n de dos m谷todos de recuento en placa para la detecci車n de colifagos som芍ticos, aportes a las metodolog赤as est芍ndar Implementation of two plate count methods for detection of somatic coliphages and contributions to the standard methodologies
%A Melissa Solano Barquero
%A Luz Mar赤a Chac車n Jim谷nez
%A Kenia Barrantes Jim谷nez
%A Rosario Ach赤 Araya
%J Revista Peruana de Biolog赤a
%D 2013
%I Ciudad Universitaria, Lima
%X Los m谷todos de recuento en placa capa doble y capa simple de agar, para la cuantificaci車n de colifagos so-m芍ticos en aguas, fueron implementados utilizando como base metodolog赤as est芍ndar. Diferentes variables fueron ensayadas, lo cual permiti車 la precisi車n en algunos pasos no incluidos en metodolog赤as est芍ndares. De los hallazgos de mayor importancia, se exponen las consecuencias de utilizar un cultivo de Escherichia coliexcesivamente concentrado y se describe la obtenci車n de un cultivo en fase logar赤tmica en solo 4 horas de incubaci車n, ajustando la concentraci車n a una densidad 車ptica de 0,3 a 600nm (3,1 x 10 8 UFC/ mL), o a un McFarland 1 (3,0 x108 UFC/ mL). Se determin車 que los controles de colifagos deben ser almacenados a -70 ∼C para reducir su degradaci車n y que se deben evitar cantidades superiores a 20 mL de mezcla de reacci車n por plato de Petri, para reducir las burbujas que pueden interferir con la lectura de unidades formadoras de placas (UFP). Se demostr車 que los colifagos de las muestras de agua pueden almacenarse 48 horas a 4 ∼C sin que sufran degradaci車n y que en las muestras con altas concentraciones de colifagos no se observa UFP porque se da una lisis confluente de la capa bacteriana. No se encontraron diferencias significativas en la recuperaci車n de colifagos al utilizar un m谷todo u otro, pero dichos m谷todos deben ser evaluados por medio de controles, antes de aplicarlos directamente en el an芍lisis de muestras de agua. Two plate count methods, double layer and single layer of agar for quantification of somatic coliphages in water, were implemented using standard methodologies. Several variables were tested and provided valuable information that was not included in standard methodologies. The most important findings are described, such as the effect of using an excessively concentrated culture of E. coliand production of a log phase culture in only 4 hours of incubation, adjusting the concentration to an optical density of 0.3 at 600 nm (3.1 x 10 8 CFU / mL), or to McFarland 1 (3.0 x 108 CFU / mL). It was determined that coliphages controls must be stored at -70 ∼C to reduce its degradation. Quantities of reaction mixture exceeding 20 mL per Petri dish must be avoided to prevent interfere with bubbles during the counting of plate forming units (PFU). It was demonstrated that coliphages isolated from water samples can be stored for 48 hours at 4 ∼C without any degradation, and PFU are not observed in samples with high concentrations of coliphages, because a confluent lysis of the bacte-rial layer. There was no significant difference in t
%K colifagos som芍ticos
%K capa doble de agar
%K capa simple de agar
%K aguas
%K indicadores virales
%U http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/rpb/article/view/1050