%0 Journal Article
%T 水蜜桃多酚氧化酶分离纯化及其酶学特性研究
%A 刘亮
%A 王如坤
%A 程慧媛
%A 曹少谦
%A 陈伟
%A 戚向阳
%J 核农学报
%P 1121-1128
%D 2015
%R 10.11869/j.issn.100-8551.2015.06.1121
%X 为建立水蜜桃多酚氧化酶(PPO)高效分离纯化方法,并明确该酶的酶学特性,本研究采用柱层析法对该酶进行分离纯化,对其反应特性及稳定性进行研究。结果表明,Phenyl-SepharoseCL-4B疏水柱层析法对水蜜桃PPO的纯化倍数与硫酸铵分级沉淀法相近,但其得率为89%远高于后者;采用Phenyl-SepharoseCL-4B、DEAESepharoseFastFlow和SephaorylHRS-200三级柱层析联用的方法对PPO分离纯化,获得PPO总纯化倍数为12.40倍,总得率为20%;该PPO组分经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析得到单一蛋白条带,其分子量为81kDa。纯化后的水蜜桃PPO对(+)-儿茶素和(-)-表儿茶素的米氏常数分别为0.14mM和0.12mM,最适反应pH值为7.0,最适反应温度为40℃。纯化后的水蜜桃PPO对热以及低pH值都很不稳定。本研究结果为进一步研究PPO酶促褐变机制提供了理论指导,同时也为其他果蔬中PPO的分离纯化提供参考。
%K 水蜜桃
%K 多酚氧化酶
%K 纯化
%K 酶学特性
%U http://www.hnxb.org/CN/abstract/abstract11736.shtml