%0 Journal Article %T 罗汉果葡萄糖基转移酶基因sgugt4的克隆及表达研究 %A 莫长明 %A 马小军 %A 唐其 %A 白隆华 %A 潘丽梅 %A 冯世鑫 %J 园艺学报 %P 523-534 %D 2015 %R 10.16420/j.issn.0513-353x.2014-0757 %X 以授粉后70d的罗汉果为材料,采用rt-pcr和race技术克隆到一个葡萄糖基转移酶基因,命名为sgugt4。该基因cdna全长1726bp,包含完整的开放阅读框1344bp,编码447个氨基酸。构建pet32a-sgugt4原核表达载体,转化大肠杆菌rossetta-gami(de3),经iptg诱导获得分子量约65kd的目的基因融合蛋白。系统进化分析表明,sgugt4与具有罗汉果苷合成活性的拟南芥和甜叶菊葡萄糖基转移酶atugt73c3、atugt73c5、atugt73c6、srugt73e1聚在一个亚家族。实时荧光定量pcr检测表明,sgugt4在罗汉果甜苷ⅴ主要积累部位果肉的表达量高于茎、叶、花和果皮,在根和种子中几乎不表达;果实发育40~50d,甜苷ⅴ开始积累,sgugt4表达量则逐渐升高,50d时急剧上升;甜苷ⅴ含量越高的品种,sgugt4表达量也越高。sgugt4可能在罗汉果甜苷ⅴ生物合成过程中发挥作用。 %K 汉果 %K 葡萄糖基转移酶 %K 基因克隆 %K 原核表达 %K 时空表达 %U http://www.ahs.ac.cn/CN/abstract/abstract4759.shtml