%0 Journal Article %T 克隆山羊成纤维细胞系的建立与生物学特性的研究 %A 刘通 %A 王恒 %A 李运生 %A 张运海 %J 华北农学报 %P 77-82 %D 2015 %R 10.7668/hbnxb.2015.05.013 %X 为研究克隆黄淮白山羊耳部皮肤成纤维细胞(cGSF)的体外培养及其生物学特性。通过组织块接种培养法和胰蛋白酶消化法均可以获得原代cGSF,但在接种培养24h后,组织块法收获的细胞贴壁率和细胞量要明显高于胰酶消化法。就生长特征而言,cGSF的生长曲线也呈现典型“S”型,到达指数增长期、平台期的时间分别为第3,6天,早于普通黄淮白山羊的皮肤成纤维细胞(GSF),后者分别为第4,8天。cGSF原代(P0)、第2代(P2)、第8代(P8)细胞的染色体数目异常率均高于相同代数的GSF。在相同转染条件下,cGSF在转染pEGFP-N1后,再经G418筛选亦可形成克隆点,扩增获得阳性细胞系。总之,源自克隆山羊的体细胞体外生长、转基因后的生物学特征有别于普通动物分离得到的细胞系。因此,利用来自克隆动物的体细胞开展研究,选择分离培养、纯化、转基因方法时需要适当调整。 %K 体细胞克隆 %K 山羊 %K 成纤维细胞 %K 生物学特性 %U http://www.hbnxb.net/CN/abstract/abstract8529.shtml