%0 Journal Article %T 多重PCR技术快速检测烤后烟叶转基因成分 %A 余婧 %A 郭玉双 %A 林世锋 %A 余世洲 %A 赵杰宏 %J 生物技术通报 %P 64-68 %D 2015 %R 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.010 %X 为提高烟叶转基因成分检测效率,建立了烤后烟叶中3种外源基因成分的多重PCR检测技术体系,通过优化该反应体系中的Mg2+、dNTP、rTaq酶、引物浓度及退火温度等参数,实验最适条件为将4对相等摩尔浓度引物预先按1:1:1:1(V/V)混合,在Mg2+为1.5mmol/L、dNTP为125μmol/L、rTaq酶1U、混合引物1μmol/L,DNA100ng,退火温度65℃,循环数35个的反应条件下,在一次PCR反应中便可同时检测烟草内源基因NR,外源基因35S启动子、NOS终止子、NPTII筛选标记基因。优化后的反应体系能够有效地检测出转基因烤后烟叶百分比含量为0.9%(V/V)的转基因成分。 %K 多重PCR %K 烤后烟叶 %K 转基因成分 %U http://biotech.caas.cn/CN/abstract/abstract10730.shtml