%0 Journal Article
%T Cre重组酶调控的OVA-HBsAg转基因乙肝模型小鼠的制备及鉴定
%A 李秀梅
%A 刘光泽
%A 陈媚娟
%A 谢勇
%A 孔祥平
%J 解放军医学杂志
%P 372-375
%D 2015
%X 目的　制备Cre重组酶调控的卵清蛋白(OVA)-HBsAg转基因小鼠，为乙肝的防治提供更好的动物模型。方法　采用原核显微注射方法将线性化的携带OVA-HBsAg基因并带有LoxP位点的质粒注入C57BL/6J×DBA小鼠受精卵的雄原核内，制备受Cre重组酶调控表达的OVA-HBsAg转基因小鼠。将F1代OVA-HBsAg阳性母鼠与本室饲育的Alb-Cre转基因阳性公鼠进行杂交，获得子代小鼠，观察Cre对OVA-HBsAg转基因小鼠HBsAg的诱导表达情况。采用PCR、ELISA和免疫组化方法检测HBsAg基因、Cre基因在转基因小鼠体内的整合及表达情况。结果　共注射受精卵491枚，成活337枚，成活率68.6%。产下F0代小鼠29只，其中PCR阳性4只，外源基因整合率13.8%。目前已传至F4代，F1-F4代PCR阳性率分别为27.5%、32.0%、22.9%、25.0%，ELISA法未检测到血清中HBsAg表达。将F1代OVA-HBsAg阳性母鼠与Alb-Cre阳性公鼠杂交，获得16只子代小鼠，PCR检测Cre基因和HBsAg基因双阳性的子代小鼠有6只，其中2只小鼠血清HBsAg检测为阳性，诱导表达阳性率为33.3%。结论　成功制备出OVA-HBsA转基因小鼠，且可稳定传代，Cre重组酶可以诱导小鼠体内HBsAg的表达。
%K 小鼠
%K 转基因
%K 重组酶类
%K 肝炎
%K 乙型
%K 慢性
%U http://www.jfjyxzz.org.cn/Magazine/Show.aspx?ID=81331