Involvement of Reactive Oxygen Species in Multi-Walled Carbon Nanotubes (MWCNTs)-Induced Cytotoxicity to RAW264.7 Cells
活性氧参与多壁碳纳米管诱导的RAW264.7细胞毒性

碳纳米管以其独特的结构和性能，在生物医药和电子等领域广泛应用，而其生态安全性也成为科学界关注的焦点。为探究多壁碳纳米管(MWCNTs)诱导的细胞毒性机制，将小鼠肺泡巨噬细胞(RAW264.7)暴露于6个浓度梯度(0、25、50、100、150和200 μg·mL-1)的MWCNTs中，应用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率，用2’,7’-二氯荧光素二乙酸(DCFH-DA)荧光染色法测定细胞内活性氧的生产量，用流式细胞方法测定MWCNTs对细胞周期的影响。同时使用抗氧化剂氮乙酰半胱氨酸(NAC)验证MWCNTs诱导的细胞氧化损伤的作用机理。结果显示，MWCNTs对RAW264.7的细胞毒性呈剂量依赖性。暴露于不同浓度的MWCNTs(25、50、100、150和200 μg·mL-1)下24 h后，细胞活力分别为对照的74%、62%、59%、51%和45%。MWCNTs对RAW264.7的周期阻滞作用主要发生在G0/G1期。200 μg·mL-1的MWCNTs处理3 h后活性氧较对照组上升6.6倍。NAC对MWCNTs细胞毒作用有明显的抑制作用，且NAC能减弱MWCNTs对RAW264.7的细胞周期阻滞作用。研究表明，活性氧能够介导MWCNTs对小鼠巨噬细胞RAW264.7的损伤，并且MWCNTS通过细胞周期G0/G1期的阻滞，诱导细胞凋亡。