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中国生物工程杂志 2009
Construction of the Expression Vector with double report gene of EGFP-LacZ and its expression in vitro
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Abstract:
构建(β-半乳糖苷酶与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双报告基因的真核表达载体,并在真核细胞中表达.采用PCR方法从质粒plenti6/V5-GW/LacZ中获取LacZ全基因,与pEGFP-C1重组后构建真核表达载体pEGFP-C1-LacZ.该重组质粒经PCR和酶切方法鉴定后,在脂质体介导下转染293FT细胞株及鸡胚成纤维细胞,通过荧光观察和组织化学方法检测Egfp和LacZ基因的表达.结果表明,LacZ基因被克隆到pEGFP-C1,成功构建了双报告基因真核表达载体.该重组质粒转染后的细胞呈现绿色荧光,组织化学方法检测到呈蓝色的细胞,表明两个报告基因均能在细胞内正确表达.
