Studies on the Purification and Characterization of an α-cyclodextrin Glucanotransferase
一种α-环糊精葡萄糖基转移酶的纯化及性质研究

报道了一种主要转化产物是α-环糊精的环糊精葡萄糖基转移酶的纯化、酶学性质和转化特性.将发酵上清液通过硫酸铵分级沉淀、疏水柱层析和离子交换层析获得表观电泳纯的酶蛋白.纯酶的分子量约为75kDa,等电点5.3.最适反应温度为50℃,最适反应pH为6.对可溶性淀粉的Km和Vmax值分别是50mg/ml和6.07 mg/ml/min.色氨酸残基为酶活力的必需基团.酶的N末端序列为-SPDTSVDNKV-.Ca2 ,Zn2 ,Fe3 ,Cu2 ,Fe2 ,Ag2 对酶活力有强烈抑制作用.纯酶催化转化条件试验表明,廉价的马铃薯淀粉是酶催化制备α-CD的适宜底物,最佳转化条件为:酶量200u/g淀粉,温度40℃,反应时间24h,总转化率达41%,其中α-环糊精占总转化产物的78%.因此,该酶不仅表现出特殊的酶学特性,而且有较好的产业化开发前景.