Próba wyja nienia przyczyny niepowodzeń w ustaleniu swoisto ci autoprzeciwcia przeciwj drowych w surowicach ANA-dodatnich na podstawie analizy poszczególnych swoisto ci przeciwcia obecnych w kr cych kompleksach immunologicznych

Autoimmunizacja to stan permanentnej obecno ci w surowicachpacjentów autoprzeciwcia i autoreaktywnych limfocytów T, które s zaanga owane w patomechanizmy chorób tkanki cznej. Autoprzeciwcia ate zosta y uznane za markery okre lonych jednostekchorobowych. S one okre lane zbiorczo jako przeciwcia a przeciwj drowe(PPJ; anti-nuclear antibodies – ANA) i wyst puj w ró nychodsetkach u chorych na uk adowe choroby tkanki cznej.Jednak w ok. 10–25% przypadków surowic pobranych od pacjentówze schorzeniami reumatycznymi, w których wynik ANA jestdodatni, nie udaje si oznaczy swoisto ci autoprzeciwcia . Jedn z mo liwych przyczyn seronegatywno ci tych surowic mo e by kompleksemia – zwykle skojarzona z fazami zaostrzenia procesupodstawowego.Celem pracy by a analiza kr cych kompleksów immunologicznych(KKI) pod k tem ewentualnej obecno ci autoprzeciwcia markerowych w osadach po PEG-6000 (glikolu polietylenowym)trudnych diagnostycznie surowic ANA-dodatnich.Zbadano 588 surowic pochodz cych z klinik i polikliniki InstytutuReumatologii, w których oznaczono: miano i typ wiecenia ANAmetod immunofluorescencji (IIF) oraz obecno wybranych autoprzeciwcia metod ELISA i Western-blotting. W przypadku 69 surowic (co stanowi o 11,7%) przy dodatnim wyniku ANA (rz du≥ 1/160) oznaczanie poszczególnych swoisto ci autoprzeciwcia da o wynik negatywny. Wobec tego zaproponowano nowe metodycznepodej cie do analizy surowic ANA-pozytywnych, w którychnie udaje si standardowymi metodami ustali swoisto ci autoprzeciwcia .Zaproponowana metoda polega na analizie swoisto ciautoprzeciwcia nie w surowicy pe nej, ale w osadach po PEG-6000z tych surowic .W ok. 84% tych osadów po dodaniu PEG uzyskano wyniki pozytywnetestów Western-blotting, przy czym w znacznym odsetku(tj. 87%) wykazano wi cej ni jedn swoisto (ryc. 1). W ród 133swoisto ci przeciwcia oznaczonych w 69 surowicach ( redniook. 2 na surowic ) przeciwcia a dla antygenów chromatynowych(anty-Hp i anty-dsDNA) stanowi y blisko 50% (73 oznaczonychswoisto ci) wszystkich oznaczanych swoisto ci. Przeciwcia a dlaantygenów ENA stanowi y 32% (43 oznaczonych swoisto ci),a pozosta e przeciwcia a wyst pi y w 10,5% badanych surowic(ryc. 2). W wi kszo ci badanych osadów po precypitacji PEG-6000(72%) uzyskano pozytywn reakcj , tj. os abienie linii po dodaniudo osadów PEG surowic anty-F(ab)2-IgG oraz tylko w ok. 30% os abieniereakcji po dodaniu surowic anty-Fc-IgG. Efekt by niezale nyod swoisto ci wykrywanego autoprzeciwcia a, co mo e wskazywa na powierzchniow lokalizacj tych autoprzeciwcia (ryc. 3, tab. I).Mo na mie nadziej , e opracow