中华蜜蜂Malvolio基因Acmvl的克隆及组织表达分析

【目的】本研究克隆了中华蜜蜂ApisceranaceranaMalvolio(Mvl)基因的cDNA序列，分析了其编码蛋白的结构特点，并探讨其mRNA在内勤蜂、采蜜蜂和采粉蜂各部位组织中的表达差异，以期为该基因的生物学功能研究提供参考。【方法】利用RT-PCR技术从中华蜜蜂内勤蜂头部组织中扩增和克隆获得Acmvl的全长序列，并采用多种生物信息学软件分析Acmvl蛋白的结构特征；采用Real-timePCR对中华蜜蜂Acmvl在内勤蜂、采蜜蜂和采粉蜂各组织中的表达特征进行分析。【结果】Acmvl基因cDNA全长为2130bp（GenBank登录号：KP662686），编码587个氨基酸，预测该蛋白分子量为65.86kD，等电点为6.03，无信号肽，存在11个跨膜结构域、9个糖基化位点和14个潜在磷酸化位点；系统发育树分析结果显示，中华蜜蜂Acmvl与其他膜翅目昆虫Malvolio聚为一支，与小鼠Musmusculus和人HomosapiensNramp家族的Nramp2聚为另一大分支，且与小鼠、水稻Oryzasativa、黑腹果蝇Drosophilamelanogaster和酵母Saccharomycescerevisiae的Nramp家族同源体在跨膜区、跨膜区带电残基及转运蛋白特征结构域上有很高的保守性，尤其是与Nramp2。Acmvl基因在中华蜜蜂各部位组织中均有表达，但高表达于内勤蜂的胸部及采蜜蜂和采粉蜂的腹部和足部，提示该基因表达的差异影响采集行为。【结论】Acmvl属于Nramp基因家族，可能为Nramp2的同源基因，该基因影响采集行为可能与转运Cu2+,Mn2+和Fe2+（尤其是Fe2+）有关。