柑橘抗逆基因nac83的克隆与表达分析

以柚[citrusmaxima（burm.）merr.]、枳[poncirustrifoliata（l.）raf.]和柠檬[c.limon（l.）burm.f.]实生苗为试材，使用电子克隆和rt-pcr的方法从中克隆到3个新的nac蛋白基因，分别命名为cmnac83、ptnac83和clnac83；并用qrt-pcr技术检测了该基因在aba、干旱、低温和高盐胁迫处理下的时空表达。结果显示：cmnac83、ptnac83和clnac83的cdna序列全长均为841bp，都含有750bp的开放阅读框（orf），编码249个氨基酸；推测其蛋白分子质量分别为24.18、28.00和28.15kd，等电点分别是9.02、9.31和9.30，且均含有nac家族的n端保守结构域；系统进化树分析表明，该3个蛋白均属于senu5亚族，与苹果nac22亲缘关系较近。实时定量qrt-pcr分析显示，nac83基因能被aba、干旱、低温和高盐胁迫诱导表达，且在不同的柑橘种类中存在表达差异。可见柚cmnac83、枳ptnac83和柠檬clnac83是nac基因家族的成员，可能在柑橘响应非生物胁迫的过程中起了重要作用。