‘巨峰’葡萄细胞分裂素氧化酶基因ckx3的克隆与表达分析

结合同源克隆和race技术在‘巨峰’葡萄（vitislabruscanabailey×v.viniferal.‘kyoho’）中克隆了细胞分裂素氧化酶基因ckx3，分析了该基因的表达特性及其对细胞分裂素的响应。序列分析表明，该基因cdna全长为2049bp（genbank登录号：kp689597），orf（开放阅读框）为1569bp，编码522个氨基酸，具有fad（黄素腺嘌呤二核苷酸）结合结构域和细胞分裂素结合结构域。该基因定位在葡萄的7号染色体上，具有4个内含子，5个外显子。氨基酸序列多重比对和系统进化树分析显示‘巨峰’葡萄ckx3与荷花nuckx3亲缘关系最近，与毛果杨同源性较高。基因表达分析结果显示‘巨峰’葡萄ckx3主要在根部和花序中大量表达，其次是在卷须和果实中有较高的表达，在茎和叶中的表达量较低；在花序发育过程中，在盛花期前表达量较低，盛花期以及盛花后表达量增加。在6-ba处理葡萄叶片后，ckx3的表达与细胞分裂素氧化酶的活性都高于对照。