LY294002与Exendin-4体外诱导人胚胎干细胞分化为胰岛素分泌细胞

目的：探讨磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol3-kinase，PI3K）抑制剂LY294002与胰升血糖素样肽-1（glucagon-likepeptide-1，GLP-1）拟似物Exendin-4体外诱导人胚胎干细胞（humanembryonicstemcells，HESc）分化为成熟胰岛素分泌细胞的影响。方法：利用“五步法”包括：HESc体外培养；拟胚体（embryoidbodies，EBs）形成；筛选巢蛋白阳性细胞；扩增巢蛋白阳性细胞；第5阶段分别加入PI3K抑制剂LY294002为实验组（LY组）和GLP-1拟似物Exendin-4为对照组（Ex组）诱导HESc定向分化。光镜下观察各阶段细胞分化特点，细胞免疫荧光染色鉴定胰岛样细胞特异蛋白表达。结果：C肽、胰高血糖素、生长抑素单染细胞阳性率及胰岛素/生长抑素、胰岛素/C肽双染细胞阳性率Ex组均高于LY组：C肽（85.7±2.1）%vs.（74.5±2.7）%，P=0.005；胰高血糖素（38.1±3.4）%vs.（27.2±2.4）%，P=0.018；生长抑素（75.4±3.7）%vs.（31.3±4.7）%，P=0.000；胰岛素/生长抑素（21.5±2.2）%vs.（3.5±0.9）%，P=0.000；胰岛素/C肽（87.5±2.4）%vs.（76.7±3.1）%，P=0.013。结论：在无血清培养体系下，LY294002较Exendin-4诱导HESc分化的胰岛素分泌细胞更加成熟。