失重对大鼠肾上腺髓质激素分泌及miRNA-375表达的影响

目的　研究模拟失重环境对大鼠肾上腺髓质激素分泌及miRNA-375表达的影响。方法　健康成年雄性Wistar大鼠56只，随机分为0h(正常对照)、6h、12h、1d、3d、5d、7d共7个组(n=8)。采用Morey-Holton尾悬吊法建立模拟失重动物模型。各组大鼠实验结束后眼球取血，取双侧肾上腺。采用放射免疫分析法检测血浆肾上腺髓质激素[多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)]水平，RT-PCR法检测肾上腺组织酪氨酸羟化酶(TH)mRNA和miRNA-375的表达，Westernblotting和免疫组化技术检测肾上腺髓质TH蛋白表达。结果　尾悬吊模拟失重条件下大鼠血浆肾上腺髓质激素波动明显，6~12h出现一过性下降，随后急剧升高，3d时形成峰值。RT-PCR结果显示，各组大鼠肾上腺组织THmRNA表达波动明显，6h时呈现一过性下降，随即上升，1d时达峰值，之后呈下降趋势，5d时形成谷值。大鼠肾上腺髓质TH蛋白表达以尾悬吊3d时染色最强。肾上腺髓质中miRNA-375表达表现为尾悬吊早期(6h)呈一过性显著升高，随后快速下降，12h、1d和3d时表达受到明显抑制，表达量显著下降，5d时表达量增加，7d时显著升高(P＜0.05)。结论　失重环境可影响大鼠肾上腺髓质激素分泌，其机制可能与miRNA-375通过复杂的信号通道调控TH表达有关。