马氏珠母贝基质金属蛋白酶基因mmp-17的克隆及表达分析

基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,mmp)是一种能够降解细胞外基质的蛋白水解酶。mmp-17是一种膜型基质金属蛋白酶,通过糖基磷脂酰肌醇连接于细胞表面,参与调控有机体的内环境稳定、宿主防御等多种生理过程。为研究mmp-17在马氏珠母贝免疫反应中的作用,实验运用race技术,克隆得到马氏珠母贝mmp-17(pinctadamartensiimmp,pm-mmp-17)基因cdna全长序列,并对其序列特征及功能进行初步分析。结果显示,pm-mmp-17基因cdna全长2794bp,开放阅读框(orf)为1923bp,编码640个氨基酸,5'utr长156bp,3'utr长715bp,分子量约为73.11ku,等电点为8.98;多序列比对和系统进化树分析表明,pm-mmp-17与其他物种的mmp具有较高的保守性,与长牡蛎的mmp-17相似性高达82%;功能结构域分析表明,pm-mmp-17有5个高度保守的结构区域:n-末端的信号肽、前导区、催化区、铰链区和c-末端的类血红素结合蛋白区;荧光定量数据分析表明,pm-mmp-17基因在马氏珠母贝的闭壳肌、珍珠囊、足、外套膜、血淋巴、肝胰腺、性腺、鳃等8个组织中均有表达,在血液中的表达量最高,闭壳肌和鳃次之;脂多糖(lps)刺激后,pm-mmp-17基因表达水平上调,12h后达到最大值,之后又逐渐下调并恢复到正常水平。研究表明,pm-mmp-17基因可能在马氏珠母贝的免疫反应中起着重要作用。