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ISSN: 2333-9721
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sox30基因在结直肠癌中的表达与甲基化分析
Keywords: sry盒包含基因30,dna甲基化,结直肠癌,甲基化特异性pcr,硫化测序pcr
Abstract:
?目的:探讨新发现的抑癌基因sry盒包含基因30(sox30)在结直肠癌中的表达及甲基化变化。方法:用逆转录pcr(rt-pcr)检测结直肠癌细胞株(hct8、hct116和sw480)中sox30mrna的表达,利用去甲基化药物5-aza-cdr处理结直肠癌细胞株72h后检测sox30基因高甲基化与其表达调控的关系。应用甲基化特异性pcr(msp)检测上述3株结直肠癌细胞株及54例结直肠肿瘤组织和10例癌旁组织sox30基因的甲基化发生情况,通过硫化测序pcr(bsp)验证结直肠癌组织和癌旁组织sox30基因的甲基化改变,并对甲基化情况与结直肠癌患者病理特征进行相关性分析。结果:sox30mrna在上述3株结直肠癌细胞株中表达与对照组相比均较低,且均发生明显高甲基化;去甲基化药物处理上述3株细胞株后,sox30mrna的表达明显得到恢复。sox30基因在大部分结直肠癌组织中均呈现高甲基化状态,甲基化发生率为79.6%(43/54);而在相应的癌旁组织中甲基化检出率较低,仅为20%(2/10)。对结直肠癌患者中sox30基因甲基化与其临床病理学资料进行相关性分析发现,sox30基因高甲基化与患者的肿瘤病理分型显著相关(p=0.045),而与患者的性别、年龄、吸烟与否、tnm分期和ducks分期无显著相关性(p均>0.05)。结论:sox30基因在结直肠癌中发生明显高甲基化修饰改变,其基因表达水平明显下调,而且其甲基化修饰率与患者肿瘤病理分型相关,提示sox30可能在结直肠癌的发生过程中起重要作用。
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