primerspanner:一个高效的定点突变pcr引物设计在线工具

基于pcr的实验策略在生物工程研究中具有广泛应用,如定点突变(site-directedmutagenesis,sdm),dna拼接和载体构建。引物设计是这类实验技术中的关键一环,因其直接影响扩增效率和pcr产物的拼合。在嵌合式引物设计方法(一对突变引物在5'端具有互补序列)的基础上,开发了一个在线工具primerspanner(ps),可简单高效获得设计定点突变引物。ps可应用于单碱基或连续多碱基替换、插入、敲除等突变形式。通过大量突变实验与测序验证,结果表明该工具设计的引物进行的定点突变效果良好1)。