trpc3参与糖氧剥夺致培养的少突胶质细胞凋亡

目的:研究瞬时受体电位通道蛋白3(transientreceptorpotentialchannel3,trpc3)是否参与糖氧剥夺(oxygenglucosedeprivation,ogd)少突胶质细胞的凋亡。方法:以原代培养的新生sd大鼠少突胶质细胞为对照组,以ogd2h的少突胶质细胞为模型组,将模型组+pyr3阻断设为处理组。采用蛋白质免疫印迹法检测trpc3蛋白的表达水平,mtt试剂盒比色法检测各组细胞存活率,annexinv-fitc试剂盒染色后经流式细胞仪检测细胞凋亡,fluo-3染色后经流式细胞仪和激光共聚焦显微镜测定胞内游离钙的变化。结果:少突胶质细胞a2b5和mbp特异性标记阳性,细胞纯度可达到95%以上;少突胶质细胞ogd2h成功建立ogd模型;ogd组trpc3蛋白表达增加;ogd组细胞活性为(54.34±6.55)%,凋亡率为(24.24±0.86)%,与对照组有显著差异(p<0.05),pyr处理组细胞存活率为(72.26±5.41)%,凋亡率为(14.82±0.28)%,与ogd组有显著差异(p<0.05);ogd组胞内游离钙浓度显著升高,而pyr3阻断以后可以部分抑制其升高。结论:trpc3表达增加介导胞内游离钙离子水平的升高可能是ogd少突胶质细胞凋亡的重要原因之一。