Pim-1 抑制剂对TNBS 诱导的小鼠炎症性肠病的疗效
Effects of Pim-1 inhibitor on mouse model of inflammatory bowel disease induced by TNBS

目的：观察莫洛尼小鼠白血病病毒的前病毒插入点激酶1(provirus integration site for Moloney murine leukemia virus kinase 1，Pim-1)抑制剂对2, 4, 6-三硝基苯磺酸(2, 4, 6-trinitrobenzenestdfonic acid，TNBS)诱导的小鼠炎症性肠病的治 疗作用，同时研究Pim-1抑制剂对肠黏膜中T细胞分化的影响。方法：将45只BALB/c小鼠随机分成5组(n=9)：溶媒对 照组、TNBS模型组、小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组。用TNBS和乙醇混合液灌肠诱导小 鼠炎症性肠病模型，小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组造模后分别采用5，10 mg/kg Pim-1抑制剂每天1次腹 腔注射，激素治疗组给予0.1 mg泼尼松每天1次灌胃，共5 d。观测各组小鼠的一般情况、疾病活动指数(disease activity index，DAI)评分、小鼠结肠长度、结肠大体标本评分及病理学评分，评估Pim-1抑制剂对小鼠炎症性肠病的治疗作 用，并与激素治疗组比较。运用RT-PCR、Western印迹分别检测Th 1，Th 2，Th 17，免疫调节性T细胞(T regulatory cell， Treg)的特异性转录因子T细胞表达的T盒(T-box expressed in T cells，T-bet)、GATA连接蛋白3(GATA binding protein3， GATA-3)、维甲酸相关孤儿受体γ(RA orphan receptor γ，RORγt)、叉头蛋白P3(forkhead box P3，Foxp3)基因及蛋白的表 达。结果：溶媒对照组小鼠无腹泻、便血，体重平稳增加，TNBS模型组小鼠逐渐出现便血、腹泻、体重减轻；与溶 媒对照组比较，TNBS模型组结肠长度明显缩短，DAI评分、结肠大体标本评分、病理学评分明显升高(P<0.05)；小 剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组小鼠便血、腹泻、体重减轻较TNBS模型组明显好转，DAI 评分、结肠长度的缩短、结肠大体标本评分、病理学评分较TNBS模型组明显降低(P<0.05)；小剂量Pim-1抑制剂组、 大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组比较，差别无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR和Western印迹结果显示：与溶媒对照 组比较，TNBS模型组GATA3和RORγt表达升高，Foxp3表达明显下降(P<0.05)，而T-bet无明显差异；与TNBS模型组比 较，小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组结肠组织中GATA3，RORγt的表达明显下降，Foxp3 的表达明显升高(P<0.05)，小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组之间比较，差别无统计学意义 (P>0.05)。RT-PCR结果显示：与TNBS模型组比较，小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组结肠 组织中T-bet的表达明显下降(P<0.05)；小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组之间比较，差别无 统计学意义(P>0.05)。Western印迹结果显示：与TNBS模型组比较，小剂量Pim-1抑制剂组、大剂量Pim-1抑制剂组结 肠组织中T-bet的表达稍下降，差别无统计学意义(P>0.05)，但激素治疗组表达明显下降(P<0.05)；小剂量Pim-1抑制剂 组、大剂量Pim-1抑制剂组、激素治疗组之间比较，差别无统计学意义(P>0.05)。结论：Pim-1抑制剂能抑制BALB/c小 鼠炎症性肠病模型Th2特异性表达因子GATA3，Th17特异性表达因子RORγt的表达，促进Treg细胞的特异性表达因子 Foxp3的表达，从而发挥抑制以Th 2和Th 17为主的免疫炎症反应，促进向Treg细胞分化的作用，对小鼠炎症性肠病具有 一定的治疗作用