miR-145靶向Glut1调节Akt通路对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响

摘 要：［目的］ 探讨微小RNA-145（miR-145）对葡萄糖转运蛋白1(Glut1)表达和丝苏氨酸激酶(Akt)信号通路的调节作用，以及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响。［方法］ 2018年2月至2019年2月20例乳腺癌样本及其癌旁组织样本进行Glut1的免疫组化染色，同时采用荧光定量PCR对组织样本中Glut1和miR-145基因表达水平进行检测。采用蛋白免疫印迹实验检测不同乳腺癌细胞株中Glut1蛋白的表达，选择Glut1表达量较高的MDA-MB-231细胞用于后续实验。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-145对Glut1的转录调控，采用磺酰罗丹明B(SRB)实验和细胞迁移侵袭(Transwell)实验验证miR-145对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响，采用Western blot实验验证Akt信号通路蛋白的表达。［结果］ 与癌旁组织相比，乳腺癌组织中Glut1蛋白和基因表达明显提高（t=7.230，P=0.002），而乳腺癌组织中miR-145表达明显下降（t=4.246，P=0.013）。乳腺癌细胞中转染miR-145后Glut1表达明显下降（t=7.664，P=0.002），并且miR-145对Glut1基因转录具有一定抑制作用，并且抑制效应依赖于Glut1基因的3′-UTR区域。乳腺癌细胞中转染miR-145后细胞在3d和4d的增殖能力（t=7.746和8.086，P=0.001和0.001）以及迁移能力明显下降（t=4.960，P=0.008），并且Akt蛋白的磷酸化水平明显下降（t=5.406，P=0.006）。［结论］ 在乳腺癌中Glut1表达和Akt信号通路的活化能够被miR-145所抑制，并且miR-145能够抑制乳腺癌细胞增殖和迁移