利用CRISPR/Cas9构建斑马鱼tbx20基因突变体及其功能分析

转录因子TBX20在脊椎动物心脏的腔室发育和维护中起至关重要的作用。利用CRISPR/Cas9系统成功制备了斑马鱼tbx20突变鱼系，T7E1检测结果显示F0敲除效率平均为42.1%，测序分析F1中突变种质遗传效率为36.7%。F2突变体中观察到心脏突变表型：48 hpf，心包腔肿大，静脉窦瘀血，环化异常，心脏结构变形；3 dpf，心脏畸形拉伸成线状结构。原位杂交和qRT-PCR结果显示，突变体中vmhc表达上调，amhc和myl7表达下调。成功制备了斑马鱼tbx20突变体，结果表明tbx20纯合突变体心脏畸形，环化受到影响，为深入探究tbx20在早期心脏腔室分化过程中的作用奠定了基础