罗非鱼肌肉乙酰胆碱酯酶的纯化、性质及农药敏感性研究

以罗非鱼脑组织为材料，研究了乙酰胆碱酯酶的分离纯化方法、性质及杀虫剂对酶的抑制作用。结果表明，当脑组织的TritonX-100抽提物采用(NH4)2SO4分级盐析、Sephadex G-100凝胶过滤和DEAE-纤维素DE23离子交换柱层析的分离纯化步骤后，可获得纯化的乙酰胆碱酯酶，酶的比活力达到20.628U.mg-1, 纯化倍数139，回收率22.1%。酶作用最适温度为35～40℃，最适pH为7.5～8.0，对碘化硫代乙酰胆碱的Km值为0.183mmol.L-1，有过量底物抑制现象，最佳底物浓度为6mmol.L-1。被测4种农药中，有机磷类杀虫剂对罗非鱼脑AChE的抑制能力高于氨基甲酸酯类，抑制能力分别为：敌敌畏 > 辛硫磷 > 三唑磷 > 灭多威， 4种杀虫剂对罗非鱼脑AChE的I50值均小于5μg.mL-1。