应用种特异性PCR技术快速鉴定辣椒实蝇

【目的】辣椒实蝇Bactroceralatifrons(Hendel)为我国重要的检疫性有害生物，其寄主范围广泛，危害严重。由于传统鉴定方法受到饲养周期、饲养条件、虫态等因素的限制，使得果蔬进出口贸易通关速度、疫情快速鉴定受到较大的影响，因此迫切需要开发关于实蝇的快速鉴定识别的技术。【方法】本研究基于mtDNACOI序列设计了一对能够准确鉴定辣椒实蝇的种特异性引物FL680和RL1057，选用辣椒实蝇作为阳性对照，选用番石榴实蝇B.correcta(Bezzi)、桔小实蝇B.dorsalis(Hendel)和颜带实蝇B.cilifer(Hendel)等20种实蝇作为阴性对照，进行PCR扩增并将PCR产物进行电泳检测。【结果】仅目标种辣椒实蝇能够扩增出清晰且单一的约378bp的条带，其余实蝇种类均未出现条带。将本实验建立的种特异性PCR（SS-PCR）鉴定方法应用于实际检疫工作中并得到了验证，表明该方法具有强的种特异性。【结论】本文提出辣椒实蝇快速鉴定识别技术可应用于实蝇的疫情监测和口岸的检疫检测工作。