剑豆SRAP-PCR反应体系的建立及优化

【目的】建立和优化剑豆Canavaliaensiformis的SRAP-PCR体系，为分析剑豆遗传多样性和建立遗传图谱打下基础.【方法】首先用单因素试验法对SRAP-PCR反应体系的5个主要影响因素（Mg2+、dNTPs、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA）各设8个浓度梯度进行试验，找到5个因素的适宜浓度范围，再采用均匀设计法进行5因素4水平和5因素3水平的2轮优化.【结果和结论】建立了剑豆SRAP-PCR最佳反应体系（25μL）：Mg2+1.75mmol/L，dNTPs200μmol/L，引物0.36μmol/L，TaqDNA聚合酶0.06U/μL，模板DNA40ng.所建立的体系稳定可靠，适用于剑豆后续的SRAP分析.