野油菜黄单胞菌中长链3-酮脂酰ACP合成酶的鉴定

【目的】研究野油菜黄单胞菌Xanthomonascampestris8004基因组中3个标注为3-酮脂酰ACP合成酶的基因XcfabF1、XcfabF2和XcfabB在脂肪酸合成过程中的功能.【方法】将这3个基因分别克隆到表达载体pBAD24M,然后转化大肠埃希菌Escherichiacoli的fabB和fabF温敏型突变株CY242和CY244，同时利用体外无细胞抽提物酶学分析FabF1、FabF2和FabB蛋白活性.【结果和结论】XcfabF1和XcfabB基因分别能遗传互补大肠埃希菌fabF和fabB突变，而XcfabF2基因则不能互补大肠埃希菌fabF或fabB突变.体外无细胞抽提物酶学分析表明FabF1和FabB都能完成辛脂酰-ACP的延伸，但FabF2则不能完成该酶促反应.XcfabB基因编码3-酮脂酰ACP合成酶I，XcfabF1基因编码3-酮脂酰ACP合成酶II，而fabF2基因不参与中长链脂肪酸的合成.