伪狂犬病病毒gE基因主要抗原表位区的原核表达及间接ELISA方法的建立

【目的】为了区分伪狂犬病病毒疫苗免疫猪和自然感染猪，建立快速诊断的方法.【方法】利用PCR方法从伪狂犬病病毒中扩增出糖蛋白E(gE)基因的主要抗原表位区，用BamHⅠ和HindⅢ双酶切后，插入原核表达载体pET-32a(+)中，构建重组表达质粒pET-gE184，并转化至大肠埃希菌EscherichiacoliBL21(DE3)，经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳和Western-blot检测，用纯化后的gE184蛋白作为包被抗原,建立间接gE184-ELISA检测方法.【结果和结论】用该方法检测290份临床猪血清样本，并与商品化ELISA试剂盒检测结果比较，两者的符合率为93.1%.