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华南农业大学学报 2015
猪流行性腹泻病毒GD-A株的分离鉴定及S基因序列分析DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2015.04.004, PP. 21-25 Keywords: 猪流行性腹泻病毒,分离,鉴定,M蛋白,S基因,间接免疫荧光,细胞传代培养 Abstract: 【目的】在广东省某疑似发生猪流行性腹泻的猪场中,采集病猪的粪便样品,经RT-PCR检测阳性的样品接种于Vero细胞,以分离猪流行性腹泻病毒.【方法】通过在细胞上的连续传代,直至能稳定增殖.并通过RT-PCR对细胞培养物进行特异性片段的检测,观察细胞病变(CPE)的发生情况,以及间接免疫荧光(IFA)检测猪流行性腹泻病毒的M蛋白,对病毒进行分离与鉴定.【结果和结论】病毒在盲传5代时能观察到典型病变,传至20代时能在Vero细胞上增殖稳定.RT-PCR、CPE与IFA的结果证明,所分离到的病毒为PEDV,并命名为GD-A株.
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