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ISSN: 2333-9721
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多重PCR技术快速检测烤后烟叶转基因成分

DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.010, PP. 64-68

Keywords: 多重PCR,烤后烟叶,转基因成分

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Abstract:

为提高烟叶转基因成分检测效率，建立了烤后烟叶中3种外源基因成分的多重PCR检测技术体系，通过优化该反应体系中的Mg2+、dNTP、rTaq酶、引物浓度及退火温度等参数，实验最适条件为将4对相等摩尔浓度引物预先按1:1:1:1(V/V)混合，在Mg2+为1.5mmol/L、dNTP为125μmol/L、rTaq酶1U、混合引物1μmol/L，DNA100ng，退火温度65℃，循环数35个的反应条件下，在一次PCR反应中便可同时检测烟草内源基因NR，外源基因35S启动子、NOS终止子、NPTII筛选标记基因。优化后的反应体系能够有效地检测出转基因烤后烟叶百分比含量为0.9%(V/V)的转基因成分。

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