低浓度亚砷酸钠下调PML蛋白表达诱导肝癌干细胞分化的分子途径

[摘要]　目的　探讨低浓度亚砷酸钠诱导肝癌干细胞(LCSCs)分化的分子途径。方法　采用免疫荧光、Westernblotting和荧光定量PCR分析肝细胞癌(HCC)组织和细胞PML、Oct4和Sox2基因的表达情况，比较低浓度亚砷酸钠处理后HCC细胞PML、Oct4和Sox2基因表达及LCSCs生物功能的变化，确定低浓度亚砷酸钠对LCSCs分化的诱导作用及其分子途径。结果　0.5μg/ml亚砷酸钠可明显抑制HuH7和原代HCC细胞形成肿瘤球，增强HuH7细胞对吡柔吡星(THP)的敏感性(P<0.01)，并抑制HuH7和原代HCC细胞移植成瘤的能力(P<0.05)。HCC组织和细胞表达PML、Oct4、Sox2mRNA和蛋白，且0.5μg/ml亚砷酸钠可使Oct4、Sox2mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.01)表达下调。0.5μg/ml亚砷酸钠处理后HuH7和原代HCC细胞PML蛋白表达明显下调(P<0.05)，而Hep3B、HepG2、SMCC-7721、HuH7和原代HCC细胞PMLmRNA表达无明显变化。0.5μg/ml亚砷酸钠可抑制含LCSCs的HuH7和原代HCC细胞关键基因Oct4、Sox2mRNA的表达(P<0.05)，而且能改变LCSCs对THP的敏感性、抑制肿瘤球形成和异体移植成瘤等生物学特征。结论　HCC组织和细胞表达PMLmRNA及蛋白，低浓度亚砷酸钠与HCC细胞内PML蛋白直接结合使之降解，PML核体(PML-NB)随之崩解，PML-NB上与增殖分化相关基因的转录被抑制，从而下调HCC细胞Oct4、Sox2等LCSCs相关基因的表达，抑制HCC细胞生长和诱导LCSCs分化。