非编码小rna（ryhb）调控禽致病性大肠杆菌毒力相关基因的分析

？以小rna（ryhb）为研究对象，探索ryhb对禽致病性大肠杆菌相关毒力基因的调控研究。采用red同源重组技术构建apec野生株（ae17）ryhb的缺失株△ryhb以及构建出回复株△ryhb-comp。运用活菌计数法分别观察ae17、△ryhb、△ryhb-comp黏附鸡胚成纤维细胞df-1的能力，并且利用real-timepcr检测ae17、△ryhb和△ryhb-comp的8个毒力基因转录水平。结果成功构建出了基因缺失株△ryhb和回复株△ryhb-comp，△ryhb黏附细胞能力较ae17均有显著地降低，约为ae17的62.5%，△ryhb-comp较△ryhb黏附能力显著上升，为△ryhb的1.4倍。同时，real-timepcr结果显示，△ryhb的bcfa、fyua、tsh、luxs、fimc、ompa毒力基因的转录水平均极显著下降（p＜0.01），其mrna转录水平分别约为ae17的19%、52%、20%、14%、28%、52%；△ryhb的iss、ibea毒力基因表达水平分别上调约1.14倍和1.2倍。表明ryhb的缺失能够减弱apec黏附df-1的能力，并且使毒力基因的转录水平有所降低。根据以上结果，推测ryhb对apec的毒力具有极其重要的调节作用。