“三法三穴”推拿手法对坐骨神经损伤大鼠痛觉功能和脊髓背角CX3CL1/CX3CR1表达的调节

摘要： 目的 通过观察脊髓背角趋化因子(C-X3-C基元)配体1(CX3CL1)/趋化因子(C-X3-C基元)受体1(CX3CR1)蛋白和mRNA表达变化,探讨“三法三穴”推拿手法对坐骨神经损伤大鼠痛觉功能改善的作用机制。方法 74只雄性Sprague-Dawley大鼠,随机分为正常组(n = 12)、假手术组(n = 24)、模型组(n = 25)和三法三穴组(n = 13)。模型组和三法三穴组制作坐骨神经损伤模型。假手术组仅暴露坐骨神经。三法三穴组造模后第7天起用按摩推拿手法模拟仪按摩殷门、承山、阳陵泉三穴。分别于造模后7 d、干预20 d进行光热耐痛阈测定;造模后7 d、干预10 d、干预20 d进行累积疼痛评分测定;并于造模后7 d和干预20 d取材,对脊髓背角CX3CL1/CX3CR1表达进行Western blotting和RT-PCR检测,干预20 d对脊髓背角小胶质细胞进行免疫荧光观察。结果 造模后7 d,与正常组比较,模型组和假手术组光热耐痛阈升高(P < 0.05);与假手术组比较,模型组和三法三穴组累积疼痛评分升高(P < 0.05);干预10 d后,三法三穴组累积疼痛评分低于模型组(P < 0.05);干预20 d后,三法三穴组光热耐痛阈和累积疼痛评分均低于模型组(P < 0.05)。造模后7 d和干预20 d后,各组CX3CL1/CX3CR1蛋白和mRNA的表达变化均无显著性差异(P > 0.05)。干预20 d后模型组小胶质细胞呈部分活化或完全活化状态,三法三穴组呈未活化或部分活化状态。结论 “三法三穴”推拿手法对坐骨神经损伤大鼠痛觉功能有改善,可能是通过CX3CL1/CX3CR1以外的途径调节小胶质细胞实现的